Advanced RNA 转染试剂-不显示-浙江艾飞生物技术有限公司

品牌:ZETA life

规格: 0.25ML/0.5ML/0.75ML/1.5ML/5ML/10ML

一、注意事项

复合物可转入含血清培养基中进行转染，24小时换液48小时收细胞

转染用的含血清培养基里面不含双抗培养基

使用高纯度的siRNA有助于获得较高的转染效率

建议转染试剂用量为 0.1 µL/ pmol siRNA

siRNA推荐实验浓度为40 nM

储存条件：4°C（拒绝冻融）有效期：1年

简易操作说明

一、实验中核酸准备要求

RNA 浓度20 uM /L。

二、操作流程

1、提前1天接种细胞：保证转染时细胞长至70-90%汇合度

2、稀释转染试剂：根据参考用量用稀释液稀释Advanced RNA™转染试剂

3、加入siRNA溶液：向2中加入siRNA溶液，充分混匀

4、孵育形成复合物：siRNA与转染试剂混匀后，室温孵育20-30分钟

注：为了达到更佳的转染效果，您可以在37℃下孵育形成复合物

5、在细胞中加入复合物：根据参考用量在细胞中加入复合物

6、分析结果：细胞继续培养2-3天后检测转染效果

三、以细胞培养板为例进行转染试剂及RNA的用量梯度说明

培养器皿	siRNA浓度	每孔体积	转染试剂	转染试剂稀释液	20µM siRNA	培养基
96-well	100 nM	100 µL	1 µL	10 µL	0.5 µL	88.5 µL
	40 nM	100 µL	0.4 µL	10 µL	0.2 µL	89.4 µL
	20 nM	100 µL	0.2 µL	10 µL	0.1 µL	89.7 µL
	10 nM	100 µL	0.1 µL	10 µL	0.05 µL	89.85 µL
24-well	100 nM	500 µL	5 µL	50 µL	2.5 µL	442.5 µL
	40 nM	500 µL	2 µL	50 µL	1 µL	447 µL
	20 nM	500 µL	1 µL	50 µL	0.5 µL	448.5 µL
	10 nM	500 µL	0.5 µL	50 µL	0.25 µL	449.25 µL
12-well	100 nM	1 mL	10 µL	100 µL	5 µL	885 µL
	40 nM	1 mL	4 µL	100 µL	2 µL	894 µL
	20 nM	1 mL	2 µL	100 µL	1 µL	897 µL
	10 nM	1 mL	1 µL	100 µL	0.5 µL	898.5 µL
6-well	100 nM	2 mL	20 µL	200 µL	10 µL	1770 µL
	40 nM	2 mL	8 µL	200 µL	4 µL	1788 µL
	20 nM	2 mL	4 µL	200 µL	2 µL	1794 µL
	10 nM	2 mL	2 µL	200 µL	1 µL	1797 µL